CRISPR/Cas9
發布時間 :2018-02-28
基因敲除;基因突變;基因敲入;基因敲低;基因過表達。

 crRNA(CRISPR-derived RNA)通過堿基配對與 tracrRNA(trans-activating RNA)結合形成 tracrRNA/crRNA 復合物,此復合物引導核酸酶 Cas9 蛋白在與crRNA 配對的序列靶位點剪切雙鏈DNA。而通過人工設計這兩種 RNA,可以改造形成具有引導作用的sgRNA(singleguide RNA),足以引導 Cas9 對 DNA 的定點切割。

作為一種 RNA 導向的 dsDNA 結合蛋白,Cas9 效應物核酸酶是已知的第一個統一因子(unifying factor),能夠共定位 RNA、DNA和蛋白,從而擁有巨大的改造潛力。將蛋白與無核酸酶的 Cas9(Cas9 nuclease-null)融合,并表達適當的 sgRNA,可靶定任何 dsDNA序列,而 sgRNA 的末端可連接到目標DNA,不影響 Cas9 的結合。因此,Cas9 能在任何 dsDNA 序列處帶來任何融合蛋白及 RNA,這為生物體的研究和改造帶來巨大潛力。

 

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① 物種信息;

② 目的基因名稱及NCBI 登入號;


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① 檢測報告(實驗儀器、試劑、方法、結果、結論);

② 測序結果:測序彩色波形圖、測序方向圖、序列堿基圖。

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