熒光素酶報告基因
發布時間 :2018-06-04
檢測啟動子活性;miRNA對靶基因調控作用

Luciferase報告基因系統是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統,該技術主要應用于以下三個方向:

          1、將待測啟動子構建至熒光素酶基因的上游,檢測啟動子活性;

          2、在轉染啟動子熒光報告基因載體的同時轉染轉錄因子的表達載體,檢測轉錄因子與目標啟動子的相互作用;

          3、將miRNA靶基因的3’UTR克隆到含雙熒光素酶報告基因載體中,并與miRNA過表達載體或mimics共轉染到細胞,檢測miRNA對靶基因調控作用。

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 啟動子活性分析:基因名稱及ID

② 轉錄調控:轉錄因子名稱及ID、靶基因名稱及ID

③ miRNA靶基因驗證:miRNA名稱、物種信息、靶基因名稱及ID


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1、啟動子活性分析:

           ① 報告基因載體(啟動子不同截斷形式);

           ② 實驗報告(引物設計、載體測序文件、酶活檢測);

2、轉錄調控:

           ① 報告基因載體(野生型、突變型);

           ② 轉錄因子表達載體;

           ③ 實驗報告(引物設計、載體測序文件、酶活檢測);

3、miRNA靶基因驗證:

           ① miRNA靶基因結合位點;

           ② 報告基因野生型載體、突變型載體;

           ③ 實驗報告(引物設計、載體測序文件、酶活檢測)。

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