酵母雙雜交技術
發布時間 :2018-06-04
蛋白質兩兩之間相互作用;蛋白質與cDNA文庫互作蛋白篩選

 酵母雙雜交系統(Yeast two-hybrid system的建立基于對真核生物調控轉錄起始過程的認識。酵母轉錄因子GAL4含兩個結構域:DNA結合功能域和轉錄激活結構域,前者可識別DNA上的特異序列,并使轉錄激活結構域定位于所調節基因的上游,后者同轉錄復合體的其他成分作用,啟動相應基因的轉錄。

 將編碼DNA結合功能域的基因與已知誘餌蛋白質基因構建在同一個表達載體上,將編碼DNA轉錄激活域的基因和與已知捕獲蛋白質基因構建在同一個表達載體上,同時將上述兩種載體轉化改造后的酵母。當兩種載體所表達的融合蛋白質能夠相互作用時,功能重建的反式作用因子能夠激活酵母基因組中的報告基因,從而通過功能互補和顯色反應確定蛋白質間的互作關系。

 

客戶提供

① 目標蛋白質名稱、物種信息、基因 ID(驗證性);

② 誘餌蛋白質名稱、物種信息、基因 ID、組織或細胞(探究性);


伯信提供

① 實驗報告(實驗儀器、試劑、方法、結果、結論)

② 文庫(探究性)。

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